酶解法是 ACE 抑制肽的常见提取方法,目前多数 采用单酶水解的方式,但得到的 ACE 抑制肽的抑制效 果有限,复合酶作用于虾类蛋白能够有助于提高水解 产物的抑制活性。以南美白对虾虾头为原料,取动、植 物和微生物来源的共 11 种蛋白酶进行单酶及复合酶 筛选,以水解度和 ACE 抑制率作为测定指标。电热恒温鼓风干燥 箱(DHG‐9023A):上海齐欣科学仪器有限公司;脂肪测 定仪(SZF‐06A):青岛精诚仪器仪表有限公司;紫外‐可 见分光光度计(SH‐6600):江苏盛奥华环保科技有限 公司。
在相同酶活的条件下,酶解产物 ACE 抑制率的差异可能是由于不同蛋白酶具有不同 的特异性,水解出的肽段活性位点不同而造成的。以黄斑海蜇为原料,经胰蛋白酶水解后所得的酶 解产物 ACE 抑制活性最强。而水解度的差异取决于 酶切位点和虾头底物的结合能力,也会依据各蛋白酶 最适水解条件不同,受到温度、酸碱度的影响。综上, 选取碱性蛋白酶、胰蛋白酶、风味蛋白酶、α‐糜蛋白酶 4 种蛋白酶参与复合酶的筛选。